周五,慕雪染一进教室,就听到大家都在讨论昨天创世和神阁的那场比赛。
“雪染,你的车钥匙。”任梦欣提溜着钥匙扣,在慕雪染面前晃了晃。
慕雪染接过钥匙,放进背包。
任梦欣又凑过来,两只胳膊叠在一起,趴在桌子上,有些无精打采道:“明天放假,你有什么打算?”
“可能会去实验室。”
“还是大挑?”
“嗯。”慕雪染心想:苏以菲的婚礼也要到了,或许会有什么有趣的事。
……
果然,端午节假期的第一天,贺筱萌就把他们叫去了708开会。
看了大半个月的文献,大家都已经对实验大致有谱了。
贺筱萌和他们讨论了一番,初步确定出了一套实验方案。
组会结束后,周颖提议道:“我们先分下工吧。”
因为她是四人当中唯一一个大三的学姐,比其他三人更有实验室经验,所以贺筱萌让她担任队长,责任就大了些。
大家点点头,“好。”
周颖拿出她的记录本,道:“筱萌师姐说了让我们至少分出六种,我们就先定八种怎么样?这样我们四个人正好一人两种。”
“可以。”
周颖点点头,“那我们就开始说实验部分。首先是预实验,要确定方便观察的最适菌液浓度,就要对菌液进行浓度梯度稀释,我们可以选10-3~10-7进行厌氧培养。”
“厌氧培养的话,是不是也要对用到的仪器进行高压灭菌?”瞿晓琳问道。
“对,所以在做实验之前,要把该用到的仪器整理出来。”周颖看向瞿晓琳道:“晓琳,这个就由你来整理吧,再查一查MRS固体培养基怎么配。”
“买现成的不行吗?”武子行道。
周颖耸耸肩,“大概现成的比较贵,老师说不如自己买来原料现配。”
“……好吧。”
慕雪染边听边做着笔记,突然想到什么,抬眸看向周颖,“既然是要厌氧培养,就要有厌氧培养箱。”
“在709公共实验室,但是我没用过。”周颖看向他们三人,皆摇摇头。“那我们唯一的男同志,这个就交给你了,你去问问师姐,然后再教给我们。”
武子行抬眸道:“没问题。”
周颖用笔点了点记录本,“嗯,预实验确定最适培养浓度之后就是对菌种的分离,得到单克隆菌落后要先提取基因组DNA,这部分我来整理用到的试剂、仪器和实验步骤吧。”
“然后雪染负责查DNA纯度怎么检测,和PCR扩增的原理、体系、条件及步骤。我负责琼脂糖凝胶电泳。”
周颖合上本子,又道:“大家先把各自负责部分所用到的试剂和仪器整理出来发给我,我再进行汇总,实验室没有的要赶紧买,不能耽误我们的实验进程,争取尽快做出预实验,但也不耽误考试复习。”
“好。”
“那没什么事的话现在就开始整理吧。”
武子行起身道:“我去找筱萌师姐。”
出了实验室,武子行敲了敲隔壁706的门,贺筱萌并不在,便拿出手机给她打电话。
“怎么了,子行?”
“师姐,我想找你问一下厌氧培养箱怎么用?”
“厌氧培养箱?我现在不在学校,你去709看一下,培养箱旁边应该有说明书,你先自己研究下,下午我才能回实验室。”
“好的。”
这边,慕雪染打开笔记本开始查DNA纯度检测。
要用到超微分光光度仪,DNA应在OD260处有显着吸收峰,而蛋白质应在OD280处有显着吸收峰,要测OD260OD280的比值来判断所提DNA的纯度,比值约等于1.8,说明所提DNA纯度较高;大于1.9,表明有RNA污染;小于1.6,表明有蛋白质、酚等污染。
慕雪染打开桌面上的Word把这些都记录了下来,仪器单列,突然想到图片上的仪器看着好眼熟,转身,对面桌子上就有一台。
这时,周颖道:“我找不到提DNA的具体步骤了,文献里面就只简洁的提了一句,并没有具体过程,不过我觉得我好像在哪见过。”
慕雪染想了想,不确定地说道:“是不是有专门提细菌基因组DNA的试剂盒?”
“对对对,我想起来了,我们实验室好像就有。”周颖拍着脑门道,“你们帮我找找,应该在上面哪个柜子里。”
慕雪染抬头扫了一遍,拉过一旁的凳子,踩着打开一个壁柜,里面有五六个大小不同的试剂盒,其中有一个写着“细菌基因组DNA提取试剂盒”,不过也只有这一盒。
“这里有。”
慕雪染从凳子上下来,打开盒子,最上面是一张说明书,看了看,递给周颖道:“这上面正好有步骤。”
“啊,太谢谢你了。”周颖笑着道,这样她就可以直接扫描提取文字了。
慕雪染又查看了里面的几瓶试剂,“这个里面没有蛋白酶K。”
“其他试剂够用吗?”周颖问道。
“应该够吧,每次也就用几百微升。”慕雪染不确定地说道。
“那还是再买一盒吧,我先记下来。”
小插曲过后,慕雪染又继续坐回自己的位置上查关于PCR扩增的相关文献。
虽然高中生物选修课本上有相关的介绍,但书上都只是些理论的知识。
再加上,慕雪染复习时也只大致看了一遍,只记得DNA母链提供复制的模板、解旋酶打开DNA双链、4种脱氧核昔酸是合成子链的原料、DNA聚合酶催化合成DNA子链、ATP为复制过程提供能量、引物使DNA聚合酶从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸。
至于反应体系、PCR仪的使用及参数设定是书本上没有的。
…
“美女们,我刚看了厌氧培养箱的说明书,貌似是有点麻烦,要多次排气进气,筱萌师姐不在,我不敢随意上手。”武子行进来道。
周颖道:“那就等师姐回来吧,至少一周后才能开始实验,不着急。”
武子行看了看手机,“十一点半了,你们去不去吃饭?等下课人就多了。”
周颖点点头,“去。”
瞿晓琳起身伸了个懒腰,“去去去,雪染走不?”
慕雪染扣上电脑,起身道:“你们去吧,我回家吃。”
“你不住校?”瞿晓琳问道。
“我住对面公寓。”
“这样啊,那我们一起下去吧。”